目的 为了揭示Bmi-1参与非小细胞肺癌顺铂敏感性调控相关的具体机制,文中通过顺铂处理后结合靶向干扰Bmi-1表达,观察对非小细胞肺癌细胞中多药耐药相关蛋白1(MDR1)及凋亡蛋白表达的影响.方法 构建靶向Bmi-1的siRNA,利用脂质体转染到非小细胞肺癌A549细胞及顺铂耐药株A549/DDP中,取对数生长期细胞随机分为3组:Bmi-1干扰组(siRNA-Bmi-1转染)、阴性对照组(siRNA阴性对照)及空白对照组(不做任何处理).通过RT-PCR及Western blot实验验证干扰效果.根据A549细胞不同处理分为4组:对照组(未处理A549细胞)、Bmi-1组(siRNA-Bmi-1处理A549细胞)、DDP组(顺铂处理A549细胞)、Bmi-1+DDP组(Bmi-1干扰结合顺铂处理A549细胞).采用CCK8实验检测A549与A549/DDP细胞中siRNA-Bmi-1处理前后,顺铂按浓度梯度(1、2、4、8、16、32、64、128、256μg/mL)加入处理24 h后的细胞存活率;流式细胞检测各组凋亡水平变化,及蛋白印迹实验分析Bmi-1、MDR1和Cleaved-Caspase-3之间联系.结果 RT-PCR法检测显示,Bmi-1干扰组mRNA表达水平较空白对照组降低(P<0.01).A549细胞和A549/DDP细胞中随着顺铂浓度的升高,细胞相对存活率逐渐降低(P<0.05);Bmi-1+DDP组细胞存活率较DDP组明显降低(P<0.05).A549细胞中,Bmi-1+DDP组细胞凋亡率[(39.65±3.41)％]较

作者：陈明军；陈奇；周月鹏

来源：医学研究生学报 2019 年 32卷 7期