背景与目的:DNA甲基转移酶(DNA methyltransferase,DNMT)3B有近40种异构体,它们的表达有组织和疾病的特异性,细胞中这些异构体的功能尚不清楚。本研究旨在探讨外源性DNMT3B4基因过表达对人胚肾细胞株293A增殖的影响及其机制。方法:将携带DNMT3B4基因的质粒pCMV-DNMT3B4及空质粒pCMV-2B转染293A细胞(293A-vector)并形成稳定表达细胞系,培养300 d后用MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的周期分布;real-time PCR蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中p21表达情况;甲基化特异PCR(MS-PCR)检测p21基因启动子区甲基化状态。结果:在接种于96孔板的第4天,2株过表达DNMT3B4的293A细胞(293A-DNMT3B4-1和293A-DNMT3B4-2)吸光度(A)值分别是293A-vector细胞的(58.92±3.47)
作者:邹明新;姜树原;张姝;闫少春;邵国;刘晓光
来源:中国癌症杂志 2014 年 2期