背景与目的：p53凋亡刺激蛋白抑制剂(inhibitor of apoptosis-stimulating protein of p53，iASPP)属于ASPP家族成员，其与p53结合，抑制p53靶基因的转录活性，抑制细胞凋亡，与肿瘤形成相关。先前该研究所在课题组发现了iASPP的一个新亚型iASPP剪切变异体(iASPP splice variant，iASPP-SV)，其是包含407个氨基酸残基的核蛋白，能与p53结合、抑制p53的转录活性，但是其与乳腺癌细胞增殖的作用还不清楚。因此，该研究旨在探讨iASPP-SV在乳腺癌发生、发展中的作用。方法：用5’-基因末端快速扩增(rapid ampliifcation of cDNA ends，RACE)方法检测乳腺癌细胞系MCF-7的iASPP-SV mRNA的5’末端序列。将pFLAG-iASPP-SV和pFLAG-iASPP(828)分别转染HEK 293细胞，采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测HEK293细胞及8种人类肿瘤细胞iASPP-SV的表达情况。建立稳定表达FLAG-iASPP-SV和FLAG-iASPP(828)的NIH 3T3细胞系，细胞增殖分析、克隆形成实验和软琼脂集落形成实验检测iASPP-SV、iASPP(828)是否促进细胞增殖、是否是癌基因。用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time lfuorescent quantitative polymerase chain reactive，RTFQ-PCR)的方法检测原发性乳腺癌iASPP-SV和iASPP(828) mRNA表达水平，确定人乳腺癌中iASPP

作者：董一楠；孔凡铭；张新伟；魏枫；孙倩

来源：中国癌症杂志 2016 年 26卷 10期