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目的: 探讨氧化高密度脂蛋白(oxHDL)对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞表达组织因子(TF)的影响及其机制.方法: 实验分为阴性对照组、阳性对照组(加组胺)、HDL、oxHDL 4组, ECV304细胞经不同浓度oxHDL、HDL(10-120 mg/L)和组胺(1×10-9-1×10-4 mol/L)处理不同时间(2-8 h)后,采用实时定量PCR (RQ-PCR)和Western bloting方法检测TF表达.同时,分别应用SP600125[c-Jun氨基端激酶(JNK) 特异性抑制剂]、SB203580[p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK) 特异性抑制剂]、 PD98059[细胞外信号调节激酶(ERK1/2) 特异性抑制剂],观察其对oxHDL和组胺诱导的ECV304细胞表达TF的影响.结果: 正常ECV304细胞未检测到TF,经组胺处理1 h后TF mRNA表达明显增加,在1×10-5 mol/L时最高,约为1×10-9 mol/L时的4.8倍.oxHDL以时间和浓度依赖性方式诱导ECV304细胞TF mRNA表达,在oxHDL 20 mg/L时最高,为10 mg/L时的1.8倍,在第6 h时TF mRNA表达水平为第2 h的5.3倍(P<0.05),并在20 mg/L时显著刺激ECV304细胞TF蛋白表达,为40 mg/L时的1.5倍,而HDL没有此效应. MAPKs(JNK、p38 MAPK、ERK1/2)抑制剂可部分解除oxHDL诱导ECV304细胞TF表达的效应,TF分别下调表达至原来的19.0

作者:卜梓斌;姜志胜;马珍妮;董宁征;赵战芝;季顺东;沈飞;江淼;王静;谢丽倩;冯雪娟;陈晶晶;阮长耿

来源:中国病理生理杂志 2009 年 25卷 4期

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作者:
卜梓斌;姜志胜;马珍妮;董宁征;赵战芝;季顺东;沈飞;江淼;王静;谢丽倩;冯雪娟;陈晶晶;阮长耿
来源:
中国病理生理杂志 2009 年 25卷 4期
标签:
组织因子 脂蛋白类,HDL p38 MAPK通路 ERK 1/2通路 JNK通路
目的: 探讨氧化高密度脂蛋白(oxHDL)对人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞表达组织因子(TF)的影响及其机制.方法: 实验分为阴性对照组、阳性对照组(加组胺)、HDL、oxHDL 4组, ECV304细胞经不同浓度oxHDL、HDL(10-120 mg/L)和组胺(1×10-9-1×10-4 mol/L)处理不同时间(2-8 h)后,采用实时定量PCR (RQ-PCR)和Western bloting方法检测TF表达.同时,分别应用SP600125[c-Jun氨基端激酶(JNK) 特异性抑制剂]、SB203580[p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK) 特异性抑制剂]、 PD98059[细胞外信号调节激酶(ERK1/2) 特异性抑制剂],观察其对oxHDL和组胺诱导的ECV304细胞表达TF的影响.结果: 正常ECV304细胞未检测到TF,经组胺处理1 h后TF mRNA表达明显增加,在1×10-5 mol/L时最高,约为1×10-9 mol/L时的4.8倍.oxHDL以时间和浓度依赖性方式诱导ECV304细胞TF mRNA表达,在oxHDL 20 mg/L时最高,为10 mg/L时的1.8倍,在第6 h时TF mRNA表达水平为第2 h的5.3倍(P<0.05),并在20 mg/L时显著刺激ECV304细胞TF蛋白表达,为40 mg/L时的1.5倍,而HDL没有此效应. MAPKs(JNK、p38 MAPK、ERK1/2)抑制剂可部分解除oxHDL诱导ECV304细胞TF表达的效应,TF分别下调表达至原来的19.0