目的:探讨shRNA介导的泛素连接酶SIAH2(seven in absentia homolog2)基因表达抑制对人肝癌细胞株HepG2细胞周期和凋亡的影响.方法:用已构建的pGenesil-SIAH2重组质粒转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察转染效率.采用RT-PCR和Western blotting技术检测重组质粒对SIAH2 mRNA和蛋白表达的影响,MTS比色法测定重组质粒转染对细胞体外增殖能力的影响,流式细胞术检测重组质粒转染后细胞周期和凋亡的变化.结果:与对照组相比,pGenesil-SIAH2能显著抑制SIAH2 mRNA和蛋白的表达水平;pGenesil-SIAH2转染组细胞增殖速度明显减慢;pGenesil-SIAH2组细胞明显阻滞于G1期,细胞凋亡率明显升高.结论:pGenesil-SIAH2能有效抑制HepG2增殖,使细胞周期阻滞在G1期,并诱导其早期凋亡.上述研究为以SIAH2为靶点的肝癌基因治疗提供实验依据.
作者：肖海；贺兴波；黄才斌；刘瑶
来源：中国病理生理杂志 2013 年 29卷 8期
