目的:研究采用人脐带间充质干细胞条件培养基(MSC-CM)治疗肝细胞氧化应激损伤中微小RNA(miRNA)的差异性表达并探讨其调控机制。方法:制备人正常肝细胞株 L02氧化应激损伤模型,体外分离培养健康人脐带间充质干细胞并制备 MSC-CM。损伤模型经 MSC-CM 治疗,用凋亡、细胞活力、细胞周期及线粒体膜电位等实验验证其治疗效果。定量 RT-qPCR 筛选差异性表达 miRNA。应用生物信息学预测其靶蛋白后使用Western blot 实验验证。结果:MSC-CM 治疗可以显著减少 H2 O2氧化应激损伤所致的细胞凋亡比率,增加细胞活力,调节细胞周期。经 RT-qPCR 筛选出显著差异表达的 miR-143、miR-145、miR-301a 与 let-7a,均在损伤后表达升高,而在 MSC-CM 作用后表达降低。 Western blot 实验结果显示 miR-143的预测靶蛋白 HK2和 ADRB1的表达在肝细胞损伤后降低,MSC-CM 作用后升高,与 miR-143调控趋势一致。结论:MSC-CM 治疗可能通过调节相关 miRNA及其靶蛋白逆转 H2 O2所致肝细胞氧化应激损伤。
作者:徐雪晶;李栋;李雪;鞠秀丽
来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 9期