目的：观察氧化应激是否可诱导骨髓间充质干细胞（ MSCs）自噬，探索在氧化应激微环境中自噬对MSCs增殖和凋亡的影响及可能机制，以期提高移植MSCs治疗糖尿病勃起功能障碍（ DMED）的效果。方法：以过氧化氢（ H2 O2）模拟氧化应激微环境。台盼兰染色细胞计数法及MTT分析检测不同浓度（0、50、100、200、400μmol／L） H2 O2对MSCs增殖的影响。联合MTT、流式细胞术、Western blot及透射电镜等方法研究H2 O2对MSCs凋亡及自噬的影响。结果：H2 O2呈浓度依耐性抑制MSCs增殖，IC50＝（384．5751±16．8895）μmol／L；Western blot 分析及透射电镜提示H2 O2在诱导MSCs凋亡的同时，诱导MSCs产生自噬；MTT分析及流式细胞术提示H2 O2组细胞增殖受抑、凋亡率上升，阻断自噬后细胞增殖进一步减弱，凋亡率进一步上升；Western blot 结果提示H2 O2诱导cleaved caspase－3增多及多聚ADP－核糖聚合酶1（ PARP1）裂解增强；阻断凋亡后，cleaved caspase－3降低及PARP1裂解减弱；阻断自噬后，cleaved caspase－3进一步增多及PARP1裂解进一步增强。结论：氧化应激对MSCs存活具有双重作用，在诱导MSCs凋亡的同时还诱导保护性自噬，阻断MSCs自噬可以增加MSCs的凋亡，因此进一步增强细胞保护性自噬将有望提高移植MSCs在糖尿
作者：刘关羽；何卫阳；朱鑫；杨帆；黄小龙；印胡滨；苟欣
来源：中国病理生理杂志 2015 年 12期
