目的 探讨微小核糖核酸-21(miRNA-21)对过氧化氢(H2O2)诱导的C-kit+心脏干细胞凋亡的作用及其机制.方法 采用酶消化法结合免疫磁珠分选法培养C-kit+心脏干细胞,然后将C-kit+心脏干细胞分为对照组(将miRNA-21模拟物阴性对照转染至C-kit+心脏干细胞48 h)、模拟物组(将miRNA-21模拟物转染至C-kit+心脏干细胞48 h)、对照+H2O2组(将miRNA-21模拟物阴性对照转染至C-kit+心脏干细胞48 h后,以100 μmol H2O2处理2h)和模拟物+H2O2组(将miRNA-21模拟物转染至C-kit+心脏干细胞48 h后,以100 μmol H2O2处理2h).采用RT-PCR检测各组miRNA-21的mRNA表达水平;采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况;采用Western blot检测各组促凋亡相关蛋白(Caspase-3和Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl-2)的蛋白表达水平.结果 (1)模拟物组的miRNA-21 mRNA表达水平高于对照组(P<0.05);对照+H2O2组的miRNA-21 mRNA表达水平低于对照组(P<0.05);模拟物+ H2O2组的miRNA-21表达水平低于模拟物组,而高于对照+H2O2组(P均<0.05).(2)对照组与模拟物组的细胞早期凋亡率差异无统计学意义[(4.57±3.45)%比(5.13±3.21)%,P> 0.05];对照+H2O2组细胞早期凋亡率高于对照组[(79.07±5.75)%比(4.57±3.45)%,P<0.05];模拟物+H2O2组细胞早期凋亡率高于模拟物组[(30
作者:赵然尊;王艳;邓文文;石蓓;龙仙萍;王正龙;陈文明
来源:中华心血管病杂志 2017 年 45卷 11期