目的:探讨乔松素对内质网应激(ERS)诱导剂衣霉素(TM)所致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的抑制作用及其机制.方法:体外培养HUVECs,分别给予6.25、12.5和25 mg/L乔松素预处理1 h,再加入TM(10 mg/L)继续培养24 h.分别采用MTT法和Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞活力和细胞凋亡情况;采用试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,并采用Hoechst 33342/PI双染法检测细胞膜损伤情况;采用West?ern blot法检测ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和ERS凋亡途径关键蛋白C/EBP同源蛋白(CHOP)的表达情况,以及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)和真核翻译起始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平;免疫荧光细胞化学法检测活化转录因子6(ATF6)的核转位情况.结果:乔松素(12.5和25 mg/L)预处理显著抑制TM所诱导的细胞活力降低、LDH漏出、PI阳性细胞率和凋亡率增加(P<0.05或P<0.01).TM显著上调GRP78和CHOP的蛋白表达水平,且促进其上游调控蛋白PERK和eIF2α磷酸化及ATF6核转位,而乔松素显著拮抗TM所致的上述变化,并呈剂量依赖性(P<0.05或P<0.01).结论:乔松素可减轻ERS诱导的HUVECs凋亡,其机制可能与抑制ATF6/PERK-CHOP信号通路的活化有关.
作者：于飞；田华；卢珊；郭亚新；王晓旭；焦鹏；宗传龙；姚树桐；秦树存
来源：中国病理生理杂志 2020 年 36卷 6期
