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目的:探讨在低氧高二氧化碳(hypoxia and hypercapnia,HH)条件下,基于AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的细胞自噬的变化及其对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖和凋亡的影响.方法:以大鼠PASMCs为研究对象,饥饿24 h后随机分为5组:正常对照(normal control,N)组、模型组(HH组)、溶剂二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组(D组)、AMPK激动剂阿卡地新(acadesine;5-aminoimidazole-4-carboxamide riboside,AICAR)组(AI组)和AMPK抑制剂dorsomorphin(compound C,CC)组(CC组).N组置于常氧环境(21%O2、5%CO2和74%N2)下培养24 h,其余4组预先加入相对应的干预药物置于HH条件(5%O2、6%CO2和89%N2)下培养24 h进行造模.造模结束后用CCK-8法测各组细胞活力;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxy?uridine,EdU)法检测细胞增殖;TUNEL检测细胞凋亡;qPCR法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62及caspase-3的mRNA表达;免疫印迹法检测AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、LC3、p62、caspase-3和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear a

作者:宋正阳;施晓倩;田云娜;王新雨;张赛;王肖婷;张聪聪;王万铁

来源:中国病理生理杂志 2022 年 38卷 8期

知识库介绍

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作者:
宋正阳;施晓倩;田云娜;王新雨;张赛;王肖婷;张聪聪;王万铁
来源:
中国病理生理杂志 2022 年 38卷 8期
标签:
肺动脉高压 低氧高二氧化碳 肺动脉平滑肌细胞 自噬 AMPK/mTOR信号通路
目的:探讨在低氧高二氧化碳(hypoxia and hypercapnia,HH)条件下,基于AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的细胞自噬的变化及其对大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖和凋亡的影响.方法:以大鼠PASMCs为研究对象,饥饿24 h后随机分为5组:正常对照(normal control,N)组、模型组(HH组)、溶剂二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)组(D组)、AMPK激动剂阿卡地新(acadesine;5-aminoimidazole-4-carboxamide riboside,AICAR)组(AI组)和AMPK抑制剂dorsomorphin(compound C,CC)组(CC组).N组置于常氧环境(21%O2、5%CO2和74%N2)下培养24 h,其余4组预先加入相对应的干预药物置于HH条件(5%O2、6%CO2和89%N2)下培养24 h进行造模.造模结束后用CCK-8法测各组细胞活力;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxy?uridine,EdU)法检测细胞增殖;TUNEL检测细胞凋亡;qPCR法检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62及caspase-3的mRNA表达;免疫印迹法检测AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、LC3、p62、caspase-3和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear a