目的 探讨氟中毒对人肝癌细胞(HepG2)线粒体凋亡及其相关蛋白的影响.方法 体外培养HepG2细胞24h,分别采用0(对照)、1、3、6、9 mmol/L氟化钠(NaF)处理细胞24 h(n=5).四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞毒性作用;提取对照组和3 mmol/L NaF处理组(氟处理组)细胞RNA和蛋白(n=6),实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测HepG2细胞中线粒体凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)mRNA和蛋白的表达;蛋白免疫印迹法检测线粒体凋亡途径相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cells lymphoma-2,Bcl-2)与Bcl-2共沉淀的X蛋白质(Bcl-as-sociated X protein,Bax)、细胞色素C(cytochrome C)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)9和3蛋白的表达.结果 0、1、3、6、9 mol/L氟处理组MTT法检测结果分别为0.307±0.031、0.333±0.028、0.230±0.011、0.178±0.001、0.152±0.003,组间比较差异有统计学意义(F=82.224,P<0.01).氟处理组AIF mRNA表达[(153.14±5.41)%]高于对照组[(100.00±4.70)%,t=-4.73,P<0.05];AIF、Bcl-2、eytochrome C(在细胞质中)、caspase9、caspase3蛋白表达[(152.16±47.30)%、(171.90±51.52)%、(458.00±19.48)%、(527.17±200.67)%、(432.70±64.27)%]均
作者:刘咏妍;禹文峰;单可人;邓成敏;官志忠
来源:中华地方病学杂志 2016 年 35卷 8期