目的 检测原核表达Lunasin(露那辛)的抗炎生物学活性,为Lunasin今后在生物医药领域的开发奠定基础.方法 利用基因工程技术将PCR扩增得到的Lunasin DNA片段定向克隆至表达载体pET28,酶切及测序鉴定后对其诱导表达,利用镍离子亲和层析法对其进行纯化;Griess法和ELISA法检测小鼠J774A.1细胞培养液中Lunasin对一氧化氮和肿瘤坏死因子仅、白细胞介素6等炎症因子含量的影响;Western blot检测Lunasin对核因子κB(NF-κB) p65磷酸化以及组织因子(TF)表达的影响.结果 成功构建了Lunasin的原核表达载体,获得纯度达90％的Lunasin多肽.Lunasin能通过抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠J774A.1细胞NF-κB的活化而抑制一氧化氮合成以及下游基因肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的表达.Lunasin对LPS诱导的J774A.1细胞TF的表达也具有显著抑制作用.结论 原核表达的Lunasin表现出显著的抗炎生物学活性,明显抑制LPS诱导的J774A.1细胞TF表达,其机制可能是通过抑制NF-κB的活化而实现的.
作者：陈玉华；付常振；李明英；李敬达；迟彦
来源：中国动脉硬化杂志 2017 年 25卷 11期
