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目的:构建人Calcineurin B(CnB)基因表达载体,在大肠杆菌中高效表达并纯化Calcineurin B蛋白.方法:用RT-PCR方法从人胎脑总RNA中反转录扩增Calcineurin B,将其插入克隆载体pGEM-T-easy中,测序鉴定阳性克隆,并将鉴定正确的Calcineurin B亚克隆至表达载体pET-32b(+),构建重组表达载体pET-CnB.结果:阳性重组子在大肠杆菌BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS中,经IPTG诱导可高效表达Calcineurin B,经15

作者:张惠丽;黄赞春;张宇;徐平;陈宇;惠汝太

来源:中国分子心脏病学杂志 2001 年 1卷 1期

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作者:
张惠丽;黄赞春;张宇;徐平;陈宇;惠汝太
来源:
中国分子心脏病学杂志 2001 年 1卷 1期
标签:
Calcineurin 基因克隆 表达 纯化
目的:构建人Calcineurin B(CnB)基因表达载体,在大肠杆菌中高效表达并纯化Calcineurin B蛋白.方法:用RT-PCR方法从人胎脑总RNA中反转录扩增Calcineurin B,将其插入克隆载体pGEM-T-easy中,测序鉴定阳性克隆,并将鉴定正确的Calcineurin B亚克隆至表达载体pET-32b(+),构建重组表达载体pET-CnB.结果:阳性重组子在大肠杆菌BL21(DE3)和BL21(DE3)pLysS中,经IPTG诱导可高效表达Calcineurin B,经15