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目的研究人血管内皮细胞生长因子121(hVEGF121)基因在pET-24a(+)中的表达,获得高效表达、具有生物学活性的rhVEGF121.方法提取人原髓白血病细胞(HL60)总RNA,RT-PCR扩增hVEGF121基因,经DNA序列分析后,克隆于高效原核表达载体pET-24a(+),并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,超滤复性,DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换和Sephacry S-100分子筛色谱纯化后,以HUVEC测定其生物学活性.结果SDS-PAGE结果显示,目的蛋白质以包涵体形式存在,表达量达菌体总蛋白质的20

作者:胡志明;马骊;周明乾;孟民杰;阮光萍;王小宁

来源:中国生化药物杂志 2005 年 26卷 3期

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作者:
胡志明;马骊;周明乾;孟民杰;阮光萍;王小宁
来源:
中国生化药物杂志 2005 年 26卷 3期
标签:
血管内皮细胞生长因子 基因克隆 表达 纯化
目的研究人血管内皮细胞生长因子121(hVEGF121)基因在pET-24a(+)中的表达,获得高效表达、具有生物学活性的rhVEGF121.方法提取人原髓白血病细胞(HL60)总RNA,RT-PCR扩增hVEGF121基因,经DNA序列分析后,克隆于高效原核表达载体pET-24a(+),并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,超滤复性,DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换和Sephacry S-100分子筛色谱纯化后,以HUVEC测定其生物学活性.结果SDS-PAGE结果显示,目的蛋白质以包涵体形式存在,表达量达菌体总蛋白质的20