[目的]探讨Notch1 siRNA对乏氧环境入骨肉瘤细胞MG-63细胞增殖和周期的影响.[方法]将骨肉瘤细胞株MG-63细胞置于乏氧(37℃、1％O2、5％ CO2)环境下培养作为实验组,以正常氧环境(37℃、21％O2、5％ CO2)下培养作为对照组,培养72 h,应用MTT方法检测不同时间乏氧培养对MG-63细胞增殖的影响;采用Notch siRNA转染乏氧环境中的MG-63细胞,MTT方法检测细胞增殖变化;流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测细胞HIF-1a、Notch1蛋白表达变化.[结果]乏氧培养可促进MG-63细胞增殖,48 h常氧及乏氧对细胞增殖的作用可见明显差异(2.164±0.075 vs 1.421±0.086) (P＜0.01).流式细胞分析显示实验组、对照组MG-63细胞培养48 h G1/G2期细胞比例分别为(41.79 ±3.25)％和(53.87±2.31)％(P＜0.05),乏氧可以促进细胞周期进展,Notch1 siRNA有效下调乏氧MG-63细胞Notch1蛋白表达,Notchl siRNA作用48 h后乏氧环境MG-63细胞周期阻滞于G1/G2期.Western-blot结果显示乏氧环境下MG-63细胞HIF-1a、Notch1蛋白表达增高.[结论]乏氧环境能通过促进MG-63细胞周期进展,从而明显促进细胞增殖,阻断Notch可逆转乏氧对MG-63细胞促增殖作用,提示Notchl是治疗骨肉瘤的有效分子靶点.

作者：李纯璞；陈元振；尚凯；郭冬梅；张开刚

来源：中国矫形外科杂志 2014 年 22卷 18期