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目的:研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药与外排泵MexAB‐OprM 的相关性。方法琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对75株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(M IC ),联合外排泵抑制剂M C207110进行外排泵表型的筛选;用反转录‐聚合酶链反应(RT‐PCR)扩增MexAB‐OprM融合蛋白结构基因 mexA以及内参基因rpoD ,并测定其mRNA的表达量,用PCR扩增MexAB‐OprM 相对高表达菌株的外排泵调节基因 mexR、nalC和 nalD ,对扩增产物进行DNA 双向测序;结果进行BLAST比对分析。结果75株铜绿假单胞菌中外排泵表型阳性菌株13株,其中10株细菌的MexAB‐OprM 相对表达量增高,此高表达MexAB‐OprM菌株的调节基因 mexR、nalC及nalD均阳性。其中9株菌 nalC均发生第71位氨基酸突变(甘氨酸→谷氨酸)、8株菌同时还有第209位氨基酸突变(丝氨酸→精氨酸),仅发现1株菌 nalD第158位氨基酸突变(苏氨酸→异亮氨酸),8株菌 mexR发生突变。结论外排泵MexAB‐OprM的高表达在铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药中可能起到重要作用。MexAB‐OprM的高表达与其调节基因突变相关。

作者:魏光;叶英;郑美娟;沈继录

来源:中国感染与化疗杂志 2015 年 3期

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作者:
魏光;叶英;郑美娟;沈继录
来源:
中国感染与化疗杂志 2015 年 3期
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铜绿假单胞菌 耐药机制 碳青霉烯类 主动外排系统 Pseudomonas aeruginosa resistance mechanism carbapenem active efflux pump
目的:研究铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药与外排泵MexAB‐OprM 的相关性。方法琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对75株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(M IC ),联合外排泵抑制剂M C207110进行外排泵表型的筛选;用反转录‐聚合酶链反应(RT‐PCR)扩增MexAB‐OprM融合蛋白结构基因 mexA以及内参基因rpoD ,并测定其mRNA的表达量,用PCR扩增MexAB‐OprM 相对高表达菌株的外排泵调节基因 mexR、nalC和 nalD ,对扩增产物进行DNA 双向测序;结果进行BLAST比对分析。结果75株铜绿假单胞菌中外排泵表型阳性菌株13株,其中10株细菌的MexAB‐OprM 相对表达量增高,此高表达MexAB‐OprM菌株的调节基因 mexR、nalC及nalD均阳性。其中9株菌 nalC均发生第71位氨基酸突变(甘氨酸→谷氨酸)、8株菌同时还有第209位氨基酸突变(丝氨酸→精氨酸),仅发现1株菌 nalD第158位氨基酸突变(苏氨酸→异亮氨酸),8株菌 mexR发生突变。结论外排泵MexAB‐OprM的高表达在铜绿假单胞菌对碳青霉烯类耐药中可能起到重要作用。MexAB‐OprM的高表达与其调节基因突变相关。