目的:制备单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白.方法:把碱性磷酸酶编码区插入pSTE2-8E5质粒DNA,用scFvC66的重链和轻链可变区DNA取代scFv-8E5的重链和轻链可变区DNA,构成表达载体pSTE2-C66-Ap在大肠杆菌中表达,用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹法分析产物活性.结果:获得一个分子量为75 kD的scFvC66-Ap融合蛋白,可结合来自KG1a细胞裂解物中的一个分子量约60 kD的蛋白质带,其结合功能可通过其碱性磷酸酶活性直接测定.结论:建立了一个用大肠杆菌制备单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的方法,它可能取代常规的碱性磷酸酶标记方法而用于免疫检测.
作者：许静；刘俊霞；李侠；宋增璇
来源：中国免疫学杂志 2003 年 19卷 10期
