目的: 设计并人工合成IN-1重组单链抗体(recombinant IN-1 single-chain antibody)的cDNA克隆,构建其表达载体,在原核系统中实现初步表达.方法:根据gene bank中发表的IN-1抗体的轻链重链序列,重新设计适于在大肠杆菌中表达的基因片段,该基因双链分35个小片段合成,经退火、复性连接成目的片段后,克隆到克隆载体pUC-18中,经全自动序列分析仪测序证实后,再亚克隆至表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,诱导表达.结果:测序结果合成的基因序列与设计的仅差一个碱基;SDS-PAGE检测显示,表达出相对分子量31 kd的融合蛋白.结论:IN-1重组单链抗体基因表达载体的构建和表达,为深入研究其生物活性奠定了基础.
作者：郑伟；王勇；吴安华；王运杰
来源：中国医科大学学报 2002 年 31卷 5期
