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目的:研究IFN-α抗HCV的作用机理及了解ISG20是否参与介导IFN-α对HCV的抑制作用.方法:用RT-PCR法及融合PCR法分别获得野生型及突变型ISG20 cDNA,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,转染含HCV复制子的Huh7细胞进行瞬时表达,通过Northern blot及Western blot分别检测HCVRNA及NS5A蛋白水平,研究表达ISG20对HCV复制子的影响.结果:构建的野生型及突变型ISG20真核表达载体在mRNA水平及蛋白水平的表达均得到证实,并且发现表达野生型ISG20对HCV复制子RNA有抑制作用.结论:成功克隆及表达了ISG20,并对其抗病毒作用进行了初步研究,提示ISG20可能介导IFN-α对HCV的抑制作用.

作者:贾因棠;魏来;蒋栋;丛旭;费然

来源:中国免疫学杂志 2006 年 22卷 11期

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作者:
贾因棠;魏来;蒋栋;丛旭;费然
来源:
中国免疫学杂志 2006 年 22卷 11期
标签:
干扰素 ISG20 克隆 表达 丙型肝炎病毒 复制子
目的:研究IFN-α抗HCV的作用机理及了解ISG20是否参与介导IFN-α对HCV的抑制作用.方法:用RT-PCR法及融合PCR法分别获得野生型及突变型ISG20 cDNA,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1上,转染含HCV复制子的Huh7细胞进行瞬时表达,通过Northern blot及Western blot分别检测HCVRNA及NS5A蛋白水平,研究表达ISG20对HCV复制子的影响.结果:构建的野生型及突变型ISG20真核表达载体在mRNA水平及蛋白水平的表达均得到证实,并且发现表达野生型ISG20对HCV复制子RNA有抑制作用.结论:成功克隆及表达了ISG20,并对其抗病毒作用进行了初步研究,提示ISG20可能介导IFN-α对HCV的抑制作用.