目的：研究肝癌特异性TCR基因TCRVα12畅2-Vβ7畅1转染T细胞后，促进T细胞识别肿瘤抗原，活化抗肿瘤免疫反应的效果。方法：构建重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV，以之感染T细胞并优化最佳感染条件。钙黄绿素染色法检测T细胞对不同肿瘤靶细胞株的杀伤活性。 Annexin V-PI双染法检测靶细胞凋亡比例。流式细胞术检测T细胞表面FasL表达比例。 ELISA法检测T细胞作用于靶细胞后IFN-γ与IL-2分泌水平。结果：成功将TCRVα12畅2-Vβ7畅1基因片段构建入嵌合型腺病毒载体，获得重组腺病毒 Ad5 F35-TRAV-TRBV。感染复数为100时，重组腺病毒有最高转染效率。感染3天后， TCRVα12 Vβ7阳性细胞比例超过25％。特异性TCR基因转染有效促进T细胞杀伤AFP阳性肝癌细胞，特异性裂解率显著提高（ P＜0畅001）。特异性TCR基因转染有效促进T细胞诱导靶细胞凋亡（ P＜0畅001）。同时，T细胞表面FasL表达比例上升（ P＜0畅001）。 TCR基因转染T细胞作用于AFP抗原阳性靶细胞后IFN-γ分泌显著提高（P＜0畅001）。结论：重组腺病毒Ad5F35-TRAV-TRBV成功介导肿瘤特异性TCR基因转染T细胞。 TCR基因转染可有效促进T细胞识别抗原阳性肿瘤细胞，并发挥抗肿瘤免疫效应。
作者：吴凤麟；张文峰；何免；杨暖；沈晗；薄华本；邵红伟；黄树林
来源：中国免疫学杂志 2014 年 7期
