目的：以Gli1 siRNA转染人肺腺癌耐药细胞A549/DDP，研究其对靶细胞顺铂耐药性的影响。方法：以Gli1 siRNA转染A549/DDP细胞，分别从mRNA和蛋白水平检测干扰效果，同时检测蛋白Bcl-2、caspase-3、cyclinD1的变化；Hoechst 33258染色观察各组细胞自发性凋亡情况；流式细胞术检测细胞周期；MTT法测定顺铂对各组细胞的半数抑制浓度（ IC50）；Annexin V-FITC法检测顺铂诱导的细胞凋亡率。结果：转染Gli1 siRNA能有效抑制Gli1在mRNA和蛋白水平上的表达（ P＝0.001）；Bcl-2和cyclinD1蛋白表达水平明显下降（P＝0.003），caspase-3表达量显著升高（P＝0.001）；实验组细胞的自发性凋亡率高于对照组；细胞周期显示：Gli1 siRNA能使更多细胞停滞在G1期；IC50值由干扰前的（12.63±1.11）μg/ml/（13.81±1.14）μg/ml下降为干扰后的（2.65±0.85）μg/ml（P＝0.000）；顺铂诱导的细胞凋亡率明显提高（35.19％±3.92％ vs 6.43％±0.11％/5.01％±0.77％，P＝0.000）。结论：利用RNA干扰技术能有效抑制Gli1基因的表达，提高A549/DDP细胞对顺铂的敏感性。这将为逆转肺癌细胞的耐药性提供新的研究思路和作用靶点。
作者：达丽隽；李华；张献全
来源：中国免疫学杂志 2014 年 8期
