目的 探讨载体表达的小干扰RNA(siRNA)影响卵巢癌耐药细胞株GLI1基因的表达,促进凋亡并逆转其顺铂耐药的可行性.方法 体外构建GLI1小发夹状RNA(shRNA)的表达质粒,脂质体法介导将其转染人SKOV3/DDP细胞.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测GLI1 mRNA的表达;使用免疫细胞化学法(ICC)检测GLI1蛋白的表达;使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定各组细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术检测其对卵巢癌细胞凋亡的影响.结果 GLI1 shRNA转染组细胞GLI1 mRNA的表达与其他两组相比明显减弱(P<0.01),GLI1蛋白表达明显下调(P<0.01);顺铂敏感性比正常对照组提高了约2.5倍;流式细胞仪检测结果显示:顺铂作用24 h后,特异性转染组细胞周期分布发生明显改变,G0/G1期细胞比例增多,而S期细胞比例减少,凋亡率显著升高.结论 针对GLI1合成的siRNA能够有效地抑制GLI1 mRNA和蛋白的表达,促进卵巢癌耐药细胞凋亡并能恢复其对顺铂的敏感性.应用.RNAi技术,能够逆转卵巢癌细胞对化疗药物的耐药性.
作者：巩向玲；宋彩霞；刘世松；王平
来源：中国肿瘤外科杂志 2010 年 2卷 2期
