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目的 原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr) 43000抗原基因(Ts43)并对重组蛋白进行抗原性鉴定.方法 将旋毛虫抗原基因Ts43克隆入原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-Ts43,经测序分析正确后转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western blotting analysis)鉴定重组蛋白的抗原性.结果 SDS-PAGE结果显示表达产物为Mr 41000的重组融合蛋白,IPTG诱导4h时表达量最大,薄层凝胶光密度扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的14.7

作者:任道锋;崔晶;王中全;韩化敏

来源:中国人兽共患病学报 2008 年 24卷 6期

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作者:
任道锋;崔晶;王中全;韩化敏
来源:
中国人兽共患病学报 2008 年 24卷 6期
标签:
旋毛虫 Ts43基因 原核表达 重组蛋白 抗原性
目的 原核表达旋毛虫相对分子质量(Mr) 43000抗原基因(Ts43)并对重组蛋白进行抗原性鉴定.方法 将旋毛虫抗原基因Ts43克隆入原核表达载体pET30a(+),构建重组表达质粒pET30a(+)-Ts43,经测序分析正确后转化大肠埃希菌BL21,以异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹分析(Western blotting analysis)鉴定重组蛋白的抗原性.结果 SDS-PAGE结果显示表达产物为Mr 41000的重组融合蛋白,IPTG诱导4h时表达量最大,薄层凝胶光密度扫描显示表达的融合蛋白占菌体蛋白总量的14.7