目的 探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性.方法 设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列.使用这3条引物,进行实时PCR反应.在PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,进行基因分型.应用熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法对100名大连地区汉族人群的血液标本进行HPA-15基因分型.此外对熔解曲线分析法的重复性进行评价.结果 100个血液标本的熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果是完全一致的.10个血标本的2次熔解曲线分析结果是一致的.大连地区汉族人群HPA- 15a、-15b基因频率分别为0.58和0.42.大连地区汉族人群与国内部分地区汉族人群相比,HPA-15等位基因频率的差异无统计学意义(P＞0.05).与新疆维吾尔族人群相比,HPA-15等位基因频率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HPA的熔解曲线基因分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法.在国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异.
作者：周世航；刘铭；于卫建；宫本兰
来源：中国输血杂志 2011 年 24卷 9期
