目的 探讨多联实时荧光定量PCR(qPCR)应用于移植术中常见病原体检测的有效性.方法 选择临床移植术后常见的24种感染病原体,设计qPCR检测体系的引物探针序列,以每种病原体的标准质粒做qPCR反应验证;优化本实验中每种病原体反应体系的引物探针效果及浓度,分析确定qPCR方法的灵敏度、相关系数(R2)、扩增效率(E)后,用四川省人民医院移植ICU提供的肝肾移植患者标本22例做检测体系的应用验证:提取标本的总核酸100μL/(人)份,均分为二,分别以多联qPCR反应体系检测,以高通量测序方法(NGS)分析微生物种类;同时对移植患者的标本2 mL/份做微生物培养法检测.比较3种检测方法的检测结果,将NGS法作为金标准,分析多联qPCR法的阳性检出率,及其与培养法和NGS检测结果的差异.结果 所建立的qPCR检测体系24种病原体的qPCR检测下限均达到101cp/μL,均为R2＞0.99;对临床肝肾移植患者标本的病原体阳性检出率59.1％(13/22),NGS法相应为63.6％(14/22)(P＞0.05)、微生物培养法为18.2％(4/22)(P＜0.05).检出的病原体比例:人类疱疹病毒6型(HHV-6)30.8％(4/13)、巨细胞病毒(HCMV)23.1％(3/13)、EB 病毒(EBV)23.1％(3/13)、人细小病毒 B19 15.4％(2/13)、流感嗜血杆菌(Hin)15.4％(2/13)、屎肠球菌(Efm)15.4％(2/13)、艰难梭菌(Cd)15.4％

作者：梁珊；吴潇潇；高瞻；岳芮名；黄杨；刘安庆；何苗

来源：中国输血杂志 2022 年 35卷 5期