目的利用转基因大鼠模型,研究人Wilson病致病基因ATP7B在铜代谢通路中的功能.方法将构建的7.1 kb含有鸡β肌动蛋白启动子的人正常ATP7B cDNA,经显微注射法导入Wilson病动物模型LEC(long-evans cinnamon)大鼠受精卵的雄性原核.以RT-PCR和Western blot分析其在转基因大鼠各组织内的表达谱;用抗大鼠铜蓝蛋白抗体检测肝细胞全铜蓝蛋白(holoceruloplasmin)的合成;同时对6～30周龄的转基因大鼠血清铜蓝蛋白亚铁氧化酶活性、血清铜浓度、胆汁的铜分泌量、以及肝、肾和脑组织中的铜含量进行分年龄段连续测定和统计学分析.结果在转基因大鼠体内,ATP7B在各种组织中获得广泛表达,其中肝和肌肉中的表达水平较高,肝细胞恢复了全铜蓝蛋白的合成,血清中的铜含量及胆汁的铜排泄量增加,肝、肾组织中的铜蓄积减少.结论完整表达人ATP7B基因产物的转基因大鼠的肝细胞,通过CPN介导的铜向血清的分泌和调节铜向胆汁的排泄,恢复了ATP7B参与铜转运功能,Wilson病的铜蓄积与ATP7B基因的突变直接相关.
作者：孟雁；三好一郎；平林真澄；本谷安正；寺田邦彦；上田正次；杉山俊博；笠井憲雪
来源：中国比较医学杂志 2004 年 14卷 4期
