本研究构建人血管性血友病因子A1A2A3区(vWF-A1A2A3)编码序列基因真核表达栽体并在CHO细胞表达,为探讨vWF-A1A2A3的生物学功能奠定基础.根据已公布的序列设计引物,用PCR方法从vWF cDNA中扩增出人vWF-A1A2A3编码序列基因片段(vWF-A1A2A3),测序正确后用限制性内切酶将目的片段插入pSectag2b载体中.酶切后通过脂质体介导转染至CHO细胞中进行表达.结果表明:重组质粒pSectag2b-vWFA1A2A3能在CHO细胞中表达,表达产物(rvWF-A1A2A3)能够与人Ⅲ型胶原结合和在瑞斯托霉素诱导下与血小板结合.结论:成功构建了rvWF-A1A2A3并表达于CHO细胞.本研究为vWF相关的生物学结构、功能研究和临床应用提供了基础.
作者：张婷婷；赵益明；江淼；阮长耿
来源：中国实验血液学杂志 2010 年 18卷 5期
