目的 构建HERG基因的真核表达载体,并在人胚胎肾细胞(HEK293)中进行表达.方法 先将pGH19-HEKG通过限制性酶sac I和EcoR I酶切得到HERG cDNA,将pIRES2-EGFP用sac I和EcoR I进行双酶切,把HERGcDNA定向克隆到plRES2-EGFP中,即构建了HERG基因的真核表达裁体pIRES2-EGFP-HERG.然后利用电穿孔法将plRES2-EGFP-HERG转染HEK293细胞.结果 在卵母细胞异源表达载体pGH19-HERG基础上,获得了真核表达载体plRES2-EGFP-HERG,并在HEK293细胞中成功进行了表达.结论 在HERG基因卵母细胞异源表达载体的基础上,构建了HERG基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-HERG,利用电穿孔法将其转染至HEK293细胞中并成功地进行了表达,为下一步进行膜片钳的研究奠定基础.
作者：桂乐；吴翔；秦小同；魏美芳；景宏美；刘毅
来源：中国现代医学杂志 2008 年 18卷 3期
