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目的 研究ERCC1基因表达与卵巢癌顺铂耐药的关系.构建携带ERCC1基因小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,观察RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响.方法 KT-PCR方法检测COC1、COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达,基因重组技术构建携带ERCC1小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,脂质体法转染COC1/DDP细胞,RT-PCR及western blot方法检测转染后细胞内ERCC1mRNA和蛋白的表达,MTT法检测转染后细胞对顺铂敏感性的改变.结果 COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达明显高于COC1细胞.重组质粒转染后,COC1/DDP细胞中ERCC1 mRNA和蛋白表达显著下调.转染后细胞对顺铂的敏感性显著增加.结论 COC1/DDP中ERCC1基因表达增强与卵巢癌顺铂耐药相关.RNA干扰抑制ERCC1基因表达能增加卵巢癌耐药细胞COC1/DDP对顺铂的敏感性.

作者:刘静;糜若然;瞿全新;熊冬生

来源:中国现代医学杂志 2008 年 18卷 10期

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刘静;糜若然;瞿全新;熊冬生
来源:
中国现代医学杂志 2008 年 18卷 10期
标签:
RNA干扰 ERCC1基因 卵巢癌 顺铂
目的 研究ERCC1基因表达与卵巢癌顺铂耐药的关系.构建携带ERCC1基因小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,观察RNA干扰ERCC1基因表达对卵巢癌顺铂敏感性的影响.方法 KT-PCR方法检测COC1、COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达,基因重组技术构建携带ERCC1小发夹干扰RNA的重组质粒表达载体,脂质体法转染COC1/DDP细胞,RT-PCR及western blot方法检测转染后细胞内ERCC1mRNA和蛋白的表达,MTT法检测转染后细胞对顺铂敏感性的改变.结果 COC1/DDP细胞中ERCC1基因表达明显高于COC1细胞.重组质粒转染后,COC1/DDP细胞中ERCC1 mRNA和蛋白表达显著下调.转染后细胞对顺铂的敏感性显著增加.结论 COC1/DDP中ERCC1基因表达增强与卵巢癌顺铂耐药相关.RNA干扰抑制ERCC1基因表达能增加卵巢癌耐药细胞COC1/DDP对顺铂的敏感性.