目的：研究抑制人胰岛素样生长因子2（IGF2）基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法：将重组人甲胎蛋白（hAFP）和人端粒酶逆转录酶（hTERT）双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3（简称siRNA3）转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞，另设阴性对照（载体pGL3-hAFP-hTERT）组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达；酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性；流式细胞仪检测转染48 h后细胞周期、细胞凋亡；Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白（Cyclin）E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果：与阴性对照组和空白对照组比较，转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱，转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低，G1期Huh-7细胞明显增加，S期Huh-7细胞明显减少；Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加，IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱，以上差异具有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。转染siRNA3表达载体的L-02细胞上述指标均无明显变化（P＞0.05）。结论：重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细

作者：胡卫；吴胜兰；王旷靖；张良鹏；潘兹书；汤绍辉

来源：中国药房 2015 年 22期