目的 探讨环状RNA FGGY(circFGGY)在肝癌中的表达以及对肝癌HepG2细胞铁死亡的影响及其相关机制.方法 应用实时荧光定量PCR检测circFGGY在正常肝细胞和肝癌HepG2细胞中的表达;应用RNA免疫沉淀(IP)实验验证musahi RNA结合蛋白2(MSI2)与circFGGY,以及circFGGY与铁死亡抑制蛋白1(FSP1)的结合作用;应用甲基化RNA免疫沉淀(MeRIP)实验验证甲基转移酶3(METTL3)与circFGGY的结合作用;应用CCK-8法、脂质过氧化物试剂盒、C11-BODIPY染色、流式细胞仪、谷胱甘肽试剂盒以及铁测定试剂盒方法 ,检测沉默circFGGY对肝癌HepG2细胞铁死亡的影响;应用Western blotting检测沉默circFGGY对FSP1蛋白表达水平的影响.结果 circFGGY在肝癌细胞中高表达,外源性敲减其表达能促进HepG2细胞的铁死亡.MSI2能够结合并促进circFGGY的形成.高表达的METTL3促进circFGGY m6A甲基化修饰,进而促进其细胞核质重分布.结论 MSI2可促进circFGGY形成,m6A甲基化修饰增多的circFGGY出核调控FSP1蛋白的表达,进而调控HepG2细胞铁死亡.
作者：喻言；钟红珊
来源：中国医科大学学报 2022 年 51卷 12期
