目的：研究坏死性凋亡（necroptosis，Nec）和p38丝裂原激活蛋白激酶（ mitogen－activated protein kinase ， MAPK）通路的相互作用在高糖引起H9 c2心肌细胞损伤中的作用。方法应用细胞计数盒检测心肌细胞存活率；双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧（ reactive oxygen spe－cies， ROS）水平；罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位（ mitochondrial membrane potential ， MMP）；蛋白质免疫印迹法测定 RIP3蛋白（反映 Nec 的指标）和p38MAPK蛋白的表达水平。结果高糖（35 mmol? L－1葡萄糖，HG）作用H9c2心肌细胞24 h可引起明显的细胞损伤，表现为细胞存活率降低，ROS生成及MMP丢失增多；应用100μmol? L－1 necrostatin－1（Nec－1，Nec特异性抑制剂）和HG 共处理心肌细胞24 h 或3μmol? L－1 SB203580（p38MAPK抑制剂）预处理心肌细胞60 min，再予HG作用24 h可减轻高糖引起的上述损伤。此外， HG作用心肌细胞1、3、6、9、12、24、36和48 h均能明显增加RIP3蛋白的表达水平，其中24 h时表达水平增加最明显。应用100μmol?L－1 Nec－1共处理或3μmol? L－1 SB203580预处理心肌细胞均能明显地抑制HG对RIP3蛋白表达的上调作用。另一方面，应用100μmol? L－1 Nec－1共处理心肌细

作者：梁伟杰；何洁仪；陈君；余盛龙；张稳柱；宋明才；陈景福；冯鉴强；廖新学

来源：中国药理学通报 2016 年 32卷 8期