目的：探究镉（二氯化镉，CdCl2）能否诱导HEK293细胞自噬与凋亡以及细胞外调节蛋白激酶（ERK）1/2和AKT蛋白在自噬中的作用。方法将绿色荧光蛋白（GFP）-微管相关蛋白Ⅰ轻链3B（LC3B）重组质粒转染至HEK293细胞24 h后，以CdCl22，4，8和10μmol·L-1诱导细胞12 h，荧光显微镜观察自噬情况；以CdCl22，4，8和10μmol·L-1诱导未转染GFP-LC3B重组质粒的HEK293细胞12 h，透射电子显微镜下观察自噬泡；Western蛋白印迹检测LC3B-Ⅱ/Ⅰ的表达变化，以及ERK1/2和AKT蛋白的磷酸化表达；流式细胞仪检测CdCl2（≤10μmol·L-1）对HEK293细胞凋亡的影响。用3-MA（自噬抑制剂）预处理CdCl210μmol·L-1诱导的HEK293细胞12 h，Western蛋白印迹检测细胞内激活型胱天蛋白酶3的表达。结果 CdCl2（≤10μmol·L-1）诱导HEK293细胞12 h，荧光显微镜下转染细胞出现绿色荧光点状聚集，电镜下观察到自噬泡，Western蛋白印迹检测到LC3B-Ⅱ/Ⅰ表达量增加（P<0.05，P<0.01），ERK1/2和AKT蛋白磷酸化水平均增加（P<0.05， P<0.01）。流式细胞仪检测出CdCl2（≤10μmol · L-1）诱导的HEK293细胞发生了细胞凋亡；加入3-MA 20μmol·L-1+CdCl210μmol·L-1后，细胞自噬被抑制，激活型胱天蛋白酶3表达增加（P<0.01）。结论低浓度CdCl

作者：刘宣宣；王文倩；毛伟平

来源：中国药理学与毒理学杂志 2016 年 30卷 5期