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目的 在骨髓转移的神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)细胞及人KP-N-RT细胞系中分别应用IFN-γ、NGF及联合应用IFN-γ和NGF作为诱导荆诱导NB细胞分化.方法 NB骨髓转移细胞的原代培养以及人KP-N-RT细胞系培养10d.第10天在原代培养细胞及KP-N-RT细胞中应用KT-PCR法检测TrkA表达水平;同时应用Western法和免疫沉降法检测KP-N-RT细胞中TrkA及磷酸化TrkA蛋白表达的不同.结果 第10天观察细胞形态学变化,在NB原代培养及KP-N-RT细胞中同时负荷IFN-γ和NGF的细胞表现出比单独负荷IFN-γ或NGF更加显著的形态学分化(P<0.01).前者细胞增殖抑制明显(P<0.01).在IFN-γ组,TrkAmRNA表达增加,NGF组未见明显改变,联合用药组有明显减少或消失.在KP-N-RT细胞中,在25IU/mLIFN-γ处理的细胞中用NGF刺激5min可致磷酸化TrkA蛋白表达增加.结论 IFN-γ通过磷酸化NGF受体激活NGF/TrkA信号传导系统诱导NB细胞的分化,甚至在侵袭性表型的NB中也有相似结果.

作者:王弘;郝良纯;薛辛东

来源:中国医学工程 2008 年 16卷 1期

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作者:
王弘;郝良纯;薛辛东
来源:
中国医学工程 2008 年 16卷 1期
标签:
神经母细胞瘤 NGF/TrkA通路 原代培养 细胞分化
目的 在骨髓转移的神经母细胞瘤(Neuroblastoma,NB)细胞及人KP-N-RT细胞系中分别应用IFN-γ、NGF及联合应用IFN-γ和NGF作为诱导荆诱导NB细胞分化.方法 NB骨髓转移细胞的原代培养以及人KP-N-RT细胞系培养10d.第10天在原代培养细胞及KP-N-RT细胞中应用KT-PCR法检测TrkA表达水平;同时应用Western法和免疫沉降法检测KP-N-RT细胞中TrkA及磷酸化TrkA蛋白表达的不同.结果 第10天观察细胞形态学变化,在NB原代培养及KP-N-RT细胞中同时负荷IFN-γ和NGF的细胞表现出比单独负荷IFN-γ或NGF更加显著的形态学分化(P<0.01).前者细胞增殖抑制明显(P<0.01).在IFN-γ组,TrkAmRNA表达增加,NGF组未见明显改变,联合用药组有明显减少或消失.在KP-N-RT细胞中,在25IU/mLIFN-γ处理的细胞中用NGF刺激5min可致磷酸化TrkA蛋白表达增加.结论 IFN-γ通过磷酸化NGF受体激活NGF/TrkA信号传导系统诱导NB细胞的分化,甚至在侵袭性表型的NB中也有相似结果.