探讨补骨脂素(psoralen)是否通过调控CD4+T细胞分化抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化及骨吸收作用,初步阐明补骨脂素抗骨质疏松作用的骨免疫学机制.采用免疫磁珠分选法从Balb/c小鼠脾脏细胞分离制备CD4+T细胞,分为空白组和补骨脂素组接种于24孔板,加入补骨脂素诱导培养3d,第4天收集各组细胞用于共培养实验.共培养实验分为RAW264.7细胞组(a组)、RAW264.7细胞+psoralen-CD4+T细胞组(b组)、RAW264.7细胞+补骨脂素组(终浓度为10μmol· L-,c组)、RAW264.7细胞+psoralen+ CD4+T细胞组(d组)等4组,共培养5d后,TRAP染色检测破骨细胞数目,共培养8d后,骨片用甲苯胺蓝染色评价骨吸收情况,RT-PCR检测CD4+T细胞RORγt,Foxp3,IL-17,TNF-α,TGF-β和IL-10等基因的表达,以及破骨细胞相关基因MMP-9,TRAP和Cat-K的表达,ELISA试剂盒检测IL-17,TNF-α,TGF-β和IL-10等细胞因子的水平.结果显示,补骨脂素显著促进CD4+T细胞的Foxp3,TGF-β和IL-10的表达,抑制CD4+T细胞的RORγt,IL-17和TNF-α的表达.psoralen-CD4T细胞能显著促进RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化,psoralen+ CD4+T细胞能显著抑制RANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化及骨吸收作用.补骨脂素通过促进CD4+T细胞中CD4+ CD25+ Treg/Th17平衡向CD4+ CD25+ Treg发展,从而

作者：李劲平；谢保平；章文娟；石丽颖；李伟娟；曾英；甘国兴；厉宇红

来源：中国中药杂志 2018 年 43卷 6期