目的 探讨高浓度地塞米松(dexamethasone,DEX)激活还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced,NADPH)氧化酶-4(NADPH oxidase 4,Nox4)途径产生氧自由基对成骨细胞凋亡的影响和作用机制.方法 设正常对照组,DEX组,DEX+N-乙酰半胱氨酸(n-acetylcysteine,NAC)组,NAC组,DEX+二亚苯基碘(diphenyleneiodonium chloride,DPI)组,DPI组.干预培养24h后,倒置显微镜下观察成骨细胞形态;MTT法检测细胞活性;荧光探针DCFH-DA检测细胞内氧自由基水平;Hoechst染色检测成骨细胞凋亡;荧光定量PCR及Western-Blot检测Nox4/NADPH氧化酶基因和蛋白的表达;Nox4 siRNA沉默细胞内Nox4/NADPH氧化酶表达后,通过荧光探针检测氧自由基水平.结果 采用1 000 nmol/L地塞米松处理成骨细胞,按照实验分组干预培养24 h,倒置相差显微镜下观察和MTT结果提示,与正常对照组相比,DEX组成骨细胞出现明显的皱缩、变形,细胞存活率显著降低,加入NAC或DPI后细胞形态良好,生长旺盛.荧光探针检测结果显示,DEX组成骨细胞内氧自由基生成(45.14％±1.49％)与正常对照组(5.86％±0.28％)相比,差异有统计学意义(P=0.000);Hoechst染色结果显示,DEX组成骨细胞凋亡(29.60％±1.52％)与正常对照组(4.12％±0.67％)相比,差异有

作者：张华峰；白树财；徐倩；李晖；李东；李呈凯；宋秀钢；泰亚飞；马信龙

来源：中华骨科杂志 2018 年 38卷 12期