目的 利用氯化钴(CoCl2)化学试剂模拟口腔鳞状细胞癌细胞低氧模型,探讨低氧环境对癌细胞生物学行为的影响.方法 用50、100、150、200 μmol/L的CoCl2化学试剂处理口腔鳞状细胞癌细胞株HSC-3及SCC-4,同时分为对照组(不含CoCl2的DMEM培养液培养细胞)和实验组(SCC-4、HSC-3细胞经不同浓度CoCl2处理).通过荧光定量PCR方法,首先在mRNA水平检测乏氧诱导因子1 α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)及下游靶基因血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)的表达,并用蛋白质印迹法进一步验证;通过细胞增殖及流式细胞术检测低氧对口腔鳞状细胞癌生长、凋亡及细胞周期的影响.采用细胞划痕及Transwell等检测细胞迁移能力的改变.结果 与对照组相比,150 μmol/L CoCl2培养24 h后,实验组SCC-4细胞内HIF-1α、VEGF及BCL-2的mRNA表达水平分别增加6.00±0.20、5.40±0.40和5.40±0.30;HSC-3细胞分别增加5.60±0.30、5.20±0.60、5.80±0.40.150 μmol/L的CoCl2培养2~3d后,HSC-3、SCC-4实验组与对照组相比,细胞生长速度降低,结果经t检验,P值均小于0.05;流式细胞术检测发现,150 μ.mol/L CoCl2培养后的细胞凋亡增加,对照组HSC-3细胞早期凋亡+晚期凋亡的比例为
作者:韩生伟;韩伟;泥艳红;王志勇;胡勤刚
来源:中华口腔医学杂志 2015 年 50卷 3期