目的利用RNA干扰（ RNAi）在人胶质瘤U251和U87-MG细胞中沉默NOB1基因的表达，探讨NOB1对恶性胶质瘤细胞增殖以及凋亡的影响。方法构建NOB1基因的短发卡（ shRNA ）慢病毒表达载体，包装成病毒颗粒并感染人胶质瘤U251和U87-MG细胞，采用实时定量聚合酶链反应检测NOB1在恶性胶质瘤细胞系中的表达。采用甲基噻唑基四唑（ MTT）比色法和克隆形成实验检测细胞增殖和克隆形成能力情况；同时利用PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡情况，观察NOB1基因对U251和U87-MG细胞增殖、凋亡的影响。结果 NOB1基因在人胶质瘤U251、U87-MG细胞系中均明显高表达。 NOB1-shRNA慢病毒能有效感染胶质瘤细胞，实验结果显示感染后U251和U87-MG细胞的增殖能力明显下降；U251克隆形成能力明显受到抑制；细胞周期在 G0/G1停滞，而且细胞出现显著性凋亡；上述差异均具有统计学意义（ P ＜0.05）。结论 NOB1在人胶质瘤U251和U87-MG细胞中高表达；降低NOB1基因的表达，可以显著降低胶质瘤细胞的增殖，并促进胶质瘤细胞凋亡；NOB1基因在体外对胶质瘤细胞的发生发展可能具有癌基因的调节作用。
作者：王洪亮；李平；赵兵
来源：中华临床医师杂志（电子版） 2013 年 4期
