目的:运用不同药物诱导肾小管上皮细胞衰老模型并进行比较。方法:分别用不同浓度D-半乳糖(D-gal)、过氧化氢(H
2O
2)、顺铂(CDDP)处理人近端肾小管上皮细胞系(HK2),采用CCK8法检测细胞活性及半数抑制浓度(IC50);衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测细胞衰老水平;蛋白免疫印迹法(western blotting)分析衰老相关基因表达;流式细胞术检测细胞周期分布及凋亡。通过苏木精-伊红(HE)染色观察D-gal模型鼠和自然衰老鼠的肾小管及间质病理变化,免疫组化检测p16表达水平。
结果:CCK8结果显示,体外给予3种药物处理后HK2活性均受到抑制,48 h IC50值分别为D-gal(365.8±9.7)mmol/L、H
2O
2(385.4±20.8)μmol/L、CDDP(8.4±1.6)μmol/L。光镜下可见3组HK2细胞生长均减慢,且SA-β-gal阳性率较对照组均增加(
P<0.05)。400 mmol/L D-gal和400 μmol/L H
2O
2处理后G0/G1期细胞较对照组分别增加(22.9±1.0)
作者:张宇;柏云;魏璐;张娟;赵卫红
来源:中华老年医学杂志 2021 年 40卷 10期