目的观察人胰岛素样生长因子1基因在海绵体平滑肌细胞中的表达及定位情况,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据.方法采用Lipofectamine 2000包裹PCDB-hIGF-1质粒和PCDB空载体,转染原代培养的大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,转染后24 h分别采用RT-PCR法检测hIGF-1基因mRNA表达,Western blot法检测hIGF-1蛋白表达,荧光免疫细胞化学法检测hIGF-1细胞定位及蛋白表达.结果RT-PCR检测到hIGF-1 mRNA表达,Western blot和荧光免疫细胞化学法均检测到hIGF-1蛋白表达,荧光免疫细胞化学法可见hIGF-1蛋白定位于阴茎海绵体细胞胞质中.结论PCDB-hIGF-1成功转染入大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞可表达hIGF-1基因,蛋白定位于胞质.
作者:蒲小勇;胡礼泉;王行环;廖庆娇;韩雪;叶林柏;田斌群;李世文;郑新民;宋健
来源:中华泌尿外科杂志 2006 年 27卷 z1期