目的 评价沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框蛋白3α(FoxO3α)信号通路在小檗碱预先给药减轻肝实质细胞缺氧复氧损伤中的作用.方法 培养AML12小鼠肝实质细胞,以1×106个/ml密度接种于6孔板(2 ml/孔)和96孔板(200 μl/孔孔),采用随机数字表法分为4组(n =36):对照组(C组)常氧条件下(5％CO22-21％O2-74％N2)培养,缺氧复氧组(H/R组)、小檗碱预先给药组(BP组)及SIRT1-siRNA(SS组)缺氧(5％CO2-1％O2-94％N2)12h、复氧条件下(5％CO2-21％O2-74％N2)培养6h,SS组缺氧前24 h加入SIRT1靶向小干扰RNA(SIRT1-siRNA),BP组和SS组缺氧前2h加入小檗碱(终浓度5 μmol/L).于复氧6h时采用MTT法测定细胞活力,ELISA法测定MDA含量和SOD活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测SIRT1及FoxO3α表达,免疫沉淀法检测FoxO3α的乙酰化水平.结果 与C组比较,H/R组、BP组和SS组细胞活力降低,MDA含量升高,SOD活性降低,细胞凋亡率升高,SIRT1表达及FoxO3α核/胞浆比值增加,细胞核FoxO3α乙酰化水平升高(P＜0.05);与H/R组比较,BP组细胞活力升高,MDA含量降低,SOD活性升高,细胞凋亡率降低,SIRT1表达及FoxO3α核/胞浆比值增加,细胞核FoxO3αα乙酰化水平升高(P＜0.05);与BP组比较,SS组细胞活力降低,MDA含量升高,SOD活性下降,细胞凋亡率

作者：盛明薇；林元邦；杜洪印；喻文立；贾莉莉

来源：中华麻醉学杂志 2017 年 37卷 4期