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目的:评价富氢液对小鼠肾缺血再灌注时NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体活性的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠30只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为5组( n=6):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)、肾缺血再灌注+NLRP3抑制剂MCC950组(I/R+M组)、肾缺血再灌注+富氢液组(I/R+H组)和肾缺血再灌注+MCC950+富氢液组(I/R+M+H组)。采用夹闭双侧肾蒂30 min后恢复灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。I/R+M组和I/R+M+H组术前连续14 d腹腔注射MCC950 20 mg/kg;I/R+H组和I/R+M+H组术后1 h腹腔注射富氢液5 ml/kg,其余各组给予等容量生理盐水。于再灌注24 h时,心脏采集血标本,检测BUN、Cr和肾损伤分子-1(Kim-1)水平,采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度。然后处死小鼠,取肾组织,光镜下观察病理学结果,采用TUNEL法测定凋亡细胞计数,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)和caspase-1及其mRNA表达水平。 结果:与S组比较,I/R组、I/R+M组、I/R+H组和I/R+M+H组血清Cr、BUN、Kim-1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,肾损伤评分和凋亡细胞计数升高,肾组织NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达上调( P<0.05

作者:林华颖;陈红光;谢克亮;于泳浩

来源:中华麻醉学杂志 2020 年 40卷 8期

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作者:
林华颖;陈红光;谢克亮;于泳浩
来源:
中华麻醉学杂志 2020 年 40卷 8期
标签:
氢 再灌注损伤 肾 NLR家族,热蛋白结构域包含蛋白3 Hydrogen Reperfusion injury Kidney NLR family, pyrindomain-containing 3 protein
目的:评价富氢液对小鼠肾缺血再灌注时NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体活性的影响。方法:雄性C57BL/6J小鼠30只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法分为5组( n=6):假手术组(S组)、肾缺血再灌注组(I/R组)、肾缺血再灌注+NLRP3抑制剂MCC950组(I/R+M组)、肾缺血再灌注+富氢液组(I/R+H组)和肾缺血再灌注+MCC950+富氢液组(I/R+M+H组)。采用夹闭双侧肾蒂30 min后恢复灌注的方法制备肾缺血再灌注损伤模型。I/R+M组和I/R+M+H组术前连续14 d腹腔注射MCC950 20 mg/kg;I/R+H组和I/R+M+H组术后1 h腹腔注射富氢液5 ml/kg,其余各组给予等容量生理盐水。于再灌注24 h时,心脏采集血标本,检测BUN、Cr和肾损伤分子-1(Kim-1)水平,采用ELISA法测定血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度。然后处死小鼠,取肾组织,光镜下观察病理学结果,采用TUNEL法测定凋亡细胞计数,分别采用Western blot法和RT-PCR法检测NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)和caspase-1及其mRNA表达水平。 结果:与S组比较,I/R组、I/R+M组、I/R+H组和I/R+M+H组血清Cr、BUN、Kim-1、TNF-α、IL-1β和IL-6水平升高,肾损伤评分和凋亡细胞计数升高,肾组织NLRP3、ASC、caspase-1及其mRNA表达上调( P<0.05