目的:评价低温对小鼠N2a细胞氧糖剥夺/复氧复糖时内质网-线粒体结构偶联(MAMs)的影响。方法:将生长状态良好的小鼠N2a细胞采用随机数字表法分为5组(
n=24):对照组(C组)、氧糖剥夺/复氧复糖组(OGD/R组)、低温组(H组)、siRNA-Mfn2转染+低温组(siMfn2+H组)和siRNA-NC转染+低温组(siNC+H组)。C组在正常条件下培养;OGD/R组氧糖剥夺3 h后复氧复糖24 h;H组氧糖剥夺3 h后,在32 ℃低温下复氧复糖24 h;siMfn2+H组和siNC+H组模型制备前48 h时分别转染siRNA-Mfn2及非特异性siRNA,余同H组。于复氧复糖24 h时,采用CCK-8法检测细胞存活率,qRT-PCR法检测Mfn2 mRNA表达水平,Western blot检测Mfn2表达水平,透射电镜下观察并测量内质网-线粒体偶联部分长度、内质网周长和线粒体周长,计算内质网-线粒体偶联部分长度/内质网周长比值和内质网-线粒体偶联部分长度/线粒体周长比值,反映MAMs水平。
结果:与C组比较,其余4组细胞存活率、Mfn2及其mRNA表达水平和MAMs水平降低(
P<0.05);与OGD/R组比较,H组和siNC+H组细胞存活率、Mfn2及其mRNA表达水平和MAMs水平升高(
P<0.05),siMfn2+H组上述指标差异无统计学意义(
P>0.05);与H组比较,siMfn2+H组细胞存活率、Mfn2及其mRNA表
作者:陈怀龙;张艳平;于群;王炳琪;高翔;张高峰;时飞
来源:中华麻醉学杂志 2020 年 40卷 11期