目的 研究泛素水解酶22(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 22,USP22)基因在肝癌中的表达及沉默USP22基因对肝癌细胞的增殖活性、细胞凋亡和细胞周期的影响.方法 采用免疫组化检测58例肝细胞癌组织及相应癌旁组织中USP22蛋白的表达情况,采用RT-PCR和Western blot检测肝癌细胞中USP22的表达水平,并合成针对USP22基因的siRNA转染肝癌细胞;采用RTPCR检测和Western blot检测转染效率;MTF法测定细胞生长抑制率;流式细胞仪测定细胞凋亡率和细胞周期;免疫印迹检测CyclinD1、CDK4和CDK6蛋白表达水平.结果 发现USP22基因在肝癌组织及细胞中高表达;用针对USP22 siRNA干扰后,USP22表达水平明显降低;MTT法检测其细胞生长抑制率为42.24％,明显高于对照组(tsiUSP22组=22.47,P＜0.01);流式细胞仪检测其细胞凋亡率为33.08％ ±4.53％,明显高于对照组(tsiUSP22组=12.34,P＜0.01);流式细胞仪检测细胞周期,发现其处于G1期细胞的百分比为68.81％ ±2.71％,明显高于对照组(tsiUSP2组=33.91,P＜0.01);Western blot检测发现细胞周期蛋白CyclinD1、CDK4和CDK6在USP22 siRNA组中的表达水平明显低于对照组(tCyclinD1=10.85,tCDK4=10.51,tCDK6=10.59,P＜0.01). 结论 UPS22基因在肝癌组织及细胞中存在异常高表达,利用siRNA干扰UP

作者：李铂；唐博；李扬；胡志高；雷彪；余水平；翁俊；徐庆；何松青

来源：中华普通外科杂志 2014 年 29卷 3期