目的：检测E6-AP基因及膜联蛋白A2( Annexin A2)在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的表达,探讨其对癌细胞增殖、凋亡及浸润转移的影响。方法设计1条无关序列Negative-siRNA作为阴性对照组和针对E6-AP基因的3条特异性E6-AP-siRNAs片段转染至MDA-MB-231细胞内作为实验组,未经处理细胞作为空白对照组,加入脂质体处理的细胞为脂质体组,利用RT-PCR检测干扰E6-AP后在MDA-MB-231细胞中 E6-AP 和 Annexin A2 mRNA 相对表达水平。选择出转染效率最高的 E6-AP-siRNA1组及阴性对照组、空白对照组继续行后续实验。 Western blot 检测干扰 E6-AP 后 E6-AP 和Annexin A2在 MDA-MB-231细胞中的蛋白的相对表达水平。利用 CCK-8试剂盒法、流式细胞术、Transwell小室侵袭实验分别检测干扰 E6-AP 后 MDA-MB-231细胞的增殖、凋亡、侵袭能力。基因的mRNA及蛋白表达水平、细胞凋亡率及细胞数的组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD法,吸光度比较采用重复测量的方差分析。结果转染72 h后, E6-AP基因干扰后各实验组( E6-AP-siRNA1组、E6-AP-siRNA2组、E6-AP-siRNA3组)及空白对照组、阴性对照组及脂质体组中的E6-AP mRNA相对表达水平分别为0.159±0.003、0.325±0.006、0.229±0.007、0.593±0.031、0.594±0.012、0.612±0.016, Annexin

作者：侯令密；谢少利；陈茂山；李敬东；Emmanuel Ajedichiga Aduah；王明浩；邓世山；幸天勇；赵小波

来源：中华乳腺病杂志（电子版） 2016 年 10卷 6期