目的:探讨丙酮酸激酶M2(PKM2)抑制剂紫草素对肾脏缺血再灌注损伤(IRI)后肾小管修复的影响。方法:8周龄雄性C57BL/6J小鼠30只随机分为6组:假手术的Sham溶剂组和Sham紫草素组,双侧肾脏IRI模型的bIRI溶剂1 d组、bIRI紫草素1 d组、bIRI溶剂3 d组、bIRI紫草素3 d组。肾脏IRI模型建立,采用双侧肾蒂夹闭28 min处理,术后4 h腹腔注射3 mg/kg紫草素或溶剂,术后1 d或3 d处死小鼠留取样本。检测各组小鼠血清肌酐、尿素氮水平;通过PAS染色观察肾组织病理学改变;免疫荧光检测丙酮酸激酶M2、增殖细胞核抗原(PCNA)、翅荚百脉根凝集素(LTL)表达;Western印迹检测肾脏的PCNA表达。体外实验,人近端肾小管上皮HK2细胞分成8组:对照组(不做缺氧处理)、模型组(缺氧/复氧处理)、模型+紫草素剂量组(缺氧/复氧后给予0.5 μM、1.0 μM、1.5 μM、2.0 μM、3.0 μM、7.0 μM紫草素干预)。采用细胞计数试剂盒检测细胞存活率、细胞生长抑制率。细胞划痕实验检测细胞迁移力。结果:肾小管损伤面积评分:bIRI紫草素1 d组高于bIRI溶剂1 d组(P<0.01),bIRI紫草素3 d组高于bIRI溶剂3 d组(P=0.0337),而假手术的Sham溶剂组和Sham紫草素组之间没有明显差别。免疫荧光(P=0.0331)和免疫印迹(P=0.0228)结果均显示,bIRI紫草素3 d组小鼠
作者:陈钰澜;陈健文;朱飞;王田田;张妍;刘娇娜;黄梦杰;吴玲玲;陈香美
来源:中华肾病研究电子杂志 2022 年 11卷 1期