目的 通过抑制Cullin 4B(简称为CUL4B)在神经胶质母细胞瘤U87和U251细胞中的表达,探讨CUL4B在神经胶质母细胞瘤形成中的作用及其机制.方法 体外实验设立3组,分别为空白对照组、Lv-shCon组以及Lv-shCUL4B组;体内实验设立2组,分别为Lv-shCon组和Lv-shCUL4B组.采用CUL4B siRNA构建慢病毒并感染U87和U251细胞株,以下调细胞中CUL4B的表达.通过实时定量PCR(qPCR)和Western blot方法检测各组细胞中CUL4B的表达.以MTT法和细胞集落形成实验分别检测细胞增殖能力和集落形成能力.通过Transwell实验检测细胞的迁移能力.采用流式细胞术进行细胞周期分析.以Western blot方法检测细胞周期和细胞迁移的相关调控因子的表达.建立U87和U251细胞移植瘤裸鼠模型,观察各组动物的瘤体生长情况.结果 qPCR和Westem blot结果表明,与空白对照组和Lv-shCon组相比,Lv-shCUL4B组U87细胞和U251细胞的CUL4B表达均下降(均P<0.01).MTT实验表明,与空白对照组相比,Lv-shCUL4B组的生长均明显受到抑制,U87细胞的增殖能力降低了63.7%,U251细胞降低了45.5%(均P<0.01).与空白对照组和Lv-shCon组相比,Lv-shCUL4B组U87和U251细胞集落均数均减少(均P<0.01).Transwell实验结果显示,U87和U251细胞Lv-shCUL4B组发生迁移的能力均低于空白对照组和Lv-s
作者:董军;姚静静;王兴强;付莛凯;杨允学;张玉海;孙国庆;李新钢
来源:中华神经外科杂志 2016 年 32卷 12期