目的 探讨丙泊酚后处理对大鼠原代皮质神经元氧糖剥夺-复糖复氧后P38蛋白激酶(P38MAPK)和促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达的影响. 方法 体外培养出生24h内的SD大鼠的皮质神经元并接种于6孔板或96孔板培养皿,分为对照组(C组,正常培养)、氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)、氧糖剥夺-复糖复氧+丙泊酚后处理组(OP组)、氧糖剥夺-复糖复氧+丙泊酚后处理组+P38MAPK阻断处理组(OPS组)、P38MAPK阻断处理组(S组)、氧糖剥夺-复糖复氧+P38MAPK阻断处理组(OS组).氧糖剥夺-复糖复氧处理是将神经元氧糖剥夺90 min并复糖复氧24 h;丙泊酚后处理为向培养基中加入丙泊酚原液(50 μmol/L)处理2 h;P38MAPK阻断处理为提前lh向培养皿中加入P38MAPK抑制剂SB202190 (50 μmol/L).收集各组处理好的神经元,采用Annexin V-FITC/PI双染色法测定神经元凋亡率,MTT法测定细胞生存率,乳酸脱氢酶法测定细胞损伤率,JC-1荧光法测定线粒体膜电位水平,荧光素-荧光素酶试剂盒测定ATP含量,Western blotting测定P38MAPK和促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平. 结果 与C组比较,O组神经元磷酸化P38MAPK表达升高,凋亡率升高,存活率降低,损伤率升高,线粒体膜电位水平和ATP含量降低,促凋亡因子Bid、Bim、Puma表达水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05).与O组比较,OP
作者:马育霞;张立民;张冬雪;刘云峰
来源:中华神经医学杂志 2016 年 15卷 5期