目的 探讨受体相互作用蛋白激酶(RIP)1和RIP3通路是否介导谷氨酸诱导的HT-22海马神经细胞死亡. 方法 (1)体外培养小鼠海马神经细胞株HT-22,分为空白对照组、zVAD组、Nec-1组、谷氨酸组、谷氨酸+zVAD组、谷氨酸+zVAD+Nec-1组、谷氨酸+Nec-1组,zVAD、Nec-1、谷氨酸的终浓度分别为20 μmol/L、30 μmol/L、3 mmol/L,作用24 h后用Cell titer glo发光法细胞活力检测试剂盒(CTG)检测细胞存活率;碘化丙啶(PD及Hoechst细胞染色检测细胞的坏死;(2)将HT-22细胞分为空白对照组、谷氨酸组、谷氨酸+Nee-1组,浓度和作用时间同上,应用MitoSox red线粒体超氧化物指示剂检测细胞线粒体内活性氧自由基(ROS)水平;(3)将HT-22细胞分为空白对照组、谷氨酸组、谷氨酸+叔丁基茴香醚(BHA)组,BHA的终浓度为100 μmol/L,作用24 h后用PI及Hoechst细胞染色检测细胞的坏死;(4)将HT-22细胞分为RIP3 siRNA组、对照组,分别转染RIP3 siRNA、siRNA对照序列,72 h后Western blotting检测2组细胞RIP3蛋白的表达;(5)将HT-22细胞分为对照组、R1P3 siRNA组、谷氨酸组、RIP3 siRNA+谷氨酸组,分别各自转染siRNA对照序列、RIP3 siRNA,48 h后加入3 mmol/L谷氨酸,24 h后用PI及Hoechst细胞染色检测细胞的坏死,CTG检测细胞存活率. 结果 (1)与空白对照组比

作者：苏兴奋；王汉东；康德智；林元相；陈伏祥

来源：中华神经医学杂志 2018 年 17卷 9期