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目的 探讨黄连碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞损伤的影响及其机制. 方法 用0.3 mmol/L的Mpp+处理SK-N-SH细胞作为PD细胞模型,记为Mpp+组,以正常培养的细胞作为空白对照组.用浓度分别为10 μmol/L、20 μmol/L、40μmol/L的黄连碱预处理4h后再用0.3 mmol/L的MPp+处理作为不同浓度黄连碱处理组.将miR-con、miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后再用0.3 mmol/L的Mpp+处理记为MPP++miR-con组、MPP++miR-146a-5p组;将anti-miR-con、anti-miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后用20 μmol/L的黄连碱预处理4h及0.3 mmol/L的Mpp+处理记为MPP++Cop+anti-miR-con组、MPP++Cop+anti-miR-146a-5p组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;Western blotting实验检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平. 结果 与空白对照组比较,Mpp+处理后SK-N-SH细胞存活率显著降低,活化caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).黄连碱处理及miR-146a-5p

作者:陈红利;梁会娟;李燕

来源:中华神经医学杂志 2020 年 19卷 1期

知识库介绍

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作者:
陈红利;梁会娟;李燕
来源:
中华神经医学杂志 2020 年 19卷 1期
标签:
黄连碱 miR-146a-5p PI3K/AKT信号通路 帕金森病 细胞损伤 Coptisine MiR-146a-5p PI3K/AKT signaling pathway Parkinson's disease Cell injury
目的 探讨黄连碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞损伤的影响及其机制. 方法 用0.3 mmol/L的Mpp+处理SK-N-SH细胞作为PD细胞模型,记为Mpp+组,以正常培养的细胞作为空白对照组.用浓度分别为10 μmol/L、20 μmol/L、40μmol/L的黄连碱预处理4h后再用0.3 mmol/L的MPp+处理作为不同浓度黄连碱处理组.将miR-con、miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后再用0.3 mmol/L的Mpp+处理记为MPP++miR-con组、MPP++miR-146a-5p组;将anti-miR-con、anti-miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后用20 μmol/L的黄连碱预处理4h及0.3 mmol/L的Mpp+处理记为MPP++Cop+anti-miR-con组、MPP++Cop+anti-miR-146a-5p组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;Western blotting实验检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平. 结果 与空白对照组比较,Mpp+处理后SK-N-SH细胞存活率显著降低,活化caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).黄连碱处理及miR-146a-5p